2026-05-28
司美格鲁肽是一种新型长效胰高糖素样肽-1受体激动剂（GLP-1RA），由17种31个氨基酸组成。其结构与天然人胰高糖素样肽-1（GLP-1）相似，氨基酸序列同源性高达94%。该药主要用于治疗2型糖尿病及其相关并发症，同时在减重和心血管疾病预防领域也展现出广阔的应用前景。目前，欧盟已批准其用于降低伴有心血管疾病的超重/肥胖成人患者发生心脏病、中风甚至癌症的风险。在减重领域，司美格鲁肽同样表现优异，可显著降低患者主要不良心血管事件（包括心血管死亡、非致死性心肌梗死等）的风险。
图1. 司美格鲁肽化合物信息
在化学合成多肽药物的药物研究中，氨基酸组成及比例分析是重要的质量控制项目之一。氨基酸组成分析是鉴定多肽/蛋白质药物的有效方法。特定的多肽/蛋白质由特定的氨基酸组成，测定各氨基酸的含量是控制产品质量的有效手段。
图2. 司美格鲁肽分子结构图
根据指导原则，对司美格鲁肽样品分别进行盐酸水解和氢氧化钠水解处理。结合BIKAI OPA-FMOC自动柱前自动衍生氨基酸分析技术，可测定司美格鲁肽的氨基酸组成，并将测定结果与产品预期的氨基酸组成及比例进行对比分析。
1. 设备：
BIKAI 1511高效液相色谱系统（四元泵-P40、自动进样器-A10CV、紫外检测器-D10、柱温箱-C10V2）
2. 软件：
V5.4.5.3
3. 被测物：
氨基酸混合标准品（天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、组氨酸、甘氨酸、苏氨酸、精氨酸、丙氨酸、α-氨基异丁酸、酪氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、正缬氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、脯氨酸）；司美格鲁肽注射液
4. 衍生化试剂：
OPA：称取40 mg邻苯二甲醛，加入3.5 ml硼酸盐缓冲液、0.5 ml乙腈和64 μl 3-巯基丙酸，溶解混匀
FMOC：称取40 mg FMOC，加入8 ml乙腈，溶解混匀
5. 样品水解
盐酸水解：采用6 mol/L HCl进行水解，产生16种氨基酸，谷氨酰胺水解为谷氨酸，色氨酸被破坏。
氢氧化钠水解：采用5 mol/L NaOH进行水解，可得到色氨酸。
6. 色谱条件：
流动相A：0.05 mol/L乙酸钠溶液-三乙胺-四氢呋喃（950:0.14:5，用2%乙酸调节pH至6.8）
流动相B：0.16 mol/L乙酸钠溶液（用2%乙酸调节pH至6.8）-甲醇-乙腈（200:400:400）
洗脱梯度：
| 组分 | 浓度 μg/ml | 保留时间 RSD (%) | 峰面积 RSD (%) |
|---|---|---|---|
| 天冬氨酸 | 111.70 | 0.18 | 2.30 |
| 谷氨酸 | 103.70 | 0.11 | 2.06 |
| 丝氨酸 | 104.40 | 0.14 | 2.31 |
| 组氨酸 | 107.10 | 0.04 | 2.77 |
| 甘氨酸 | 106.20 | 0.06 | 2.69 |
| 苏氨酸 | 109.20 | 0.05 | 2.35 |
| 精氨酸 | 107.30 | 0.08 | 2.35 |
| 丙氨酸 | 99.50 | 0.09 | 2.31 |
| α-氨基异丁酸 | 112.40 | 0.16 | 2.48 |
| 酪氨酸 | 119.67 | 0.17 | 2.26 |
| 缬氨酸 | 112.30 | 0.15 | 2.17 |
| 蛋氨酸 | 103.90 | 0.19 | 2.13 |
| 正缬氨酸 | 100.00 | 0.16 | 2.31 |
| 亮氨酸 | 104.20 | 0.15 | 2.04 |
| 苯丙氨酸 | 101.60 | 0.17 | 2.29 |
| 异亮氨酸 | 102.90 | 0.12 | 2.44 |
| 亮氨酸 | 105.50 | 0.17 | 2.02 |
| 赖氨酸 | 104.10 | 0.17 | 3.16 |
| 脯氨酸 | 104.00 | 0.07 | 6.72 |
线性：
| 组分 | 线性范围 μg/ml | 回归方程 | |
|---|---|---|---|
| 天冬氨酸 | 5.59~111.70 | 0.9998 | |
| 谷氨酸 | 5.19~103.70 | 0.9999 | |
| 丝氨酸 | 5.22~104.40 | 0.9998 | |
| 组氨酸 | 5.36~107.10 | 1.0000 | |
| 甘氨酸 | 5.31~106.20 | 0.9999 | |
| 苏氨酸 | 4.46~109.20 | 0.9998 | |
| 精氨酸 | 5.37~107.30 | 0.9999 | |
| 丙氨酸 | 4.98~99.50 | 0.9999 | |
| α-氨基异丁酸 | 5.62~112.40 | 0.9999 | |
| 酪氨酸 | 5.98~119.67 | 0.9998 | |
| 缬氨酸 | 5.62~112.30 | 0.9999 | |
| 蛋氨酸 | 5.20~103.90 | 0.9999 | |
| 正缬氨酸 | 5.00~100.00 | 0.9999 | |
| 亮氨酸 | 5.21~104.20 | 0.9999 | |
| 苯丙氨酸 | 5.08~101.60 | 0.9999 | |
| 异亮氨酸 | 5.15~102.90 | 0.9999 | |
| 亮氨酸 | 5.28~105.50 | 0.9999 | |
| 赖氨酸 | 5.21~104.10 | 0.9996 | |
| 脯氨酸 | 5.20~104.00 | 0.9998 |
样品测试：
| 组分 | 理论氨基酸个数 | 实际测得氨基酸个数 |
|---|---|---|
| 天冬氨酸 | 1 | 1 |
| 谷氨酸 | 3+1 | 4.2 |
| 丝氨酸 | 3 | 2.8 |
| 组氨酸 | 1 | 1.1 |
| 甘氨酸 | 4 | 3.8 |
| 苏氨酸 | 2 | 1.9 |
| 精氨酸 | 2 | 2.1 |
| 丙氨酸 | 3 | 2.7 |
| α-氨基异丁酸 | 1 | 0.9 |
| 酪氨酸 | 1 | 0.9 |
| 缬氨酸 | 2 | 1.8 |
| 蛋氨酸 | 1 | 1.0 |
| 正缬氨酸 | 2 | 2.0 |
| 亮氨酸 | 1 | 1.0 |
| 苯丙氨酸 | 2 | 2.1 |
| 异亮氨酸 | 1 | 1.1 |
司美格鲁肽样品中共检出十七种氨基酸，与理论氨基酸组成一致。氨基酸比例与理论值的相对误差在10%以内，表明结果准确可靠。
结果图谱：
图3：19种氨基酸对照品图谱
图4：司美格鲁肽酸水解液图谱
用微信扫描
有疑惑需要解答？期待您的留言
+86 18613365565
info@bikaicorp.com
